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土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)檢測試劑盒(微量法 100T/48S)

貨號 SH0342 售價(元) 1800
規(guī)格 100T/48S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0342

土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)檢測試劑盒(微量法 100T/48S)

100管/48樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義:

S-LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性變化與機體某些病理狀態(tài)密切相關。

測定原理:

S-LAP分解L-亮氨酰對硝基苯胺生成對硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算S-LAP活性。

試劑的組成和配制:

產(chǎn)品名稱

SH0342-100T/48S

Storage

試劑一:液體

35ml

4℃

試劑二:粉劑

1

-20

說明書

一份

自備儀器和用品:

酶標儀/可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板/微量石英比色皿和蒸餾水。

S-LAP測定步驟:

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至405nm,蒸餾水調(diào)零。

2、在試劑二瓶中加入15ml試劑一充分溶解(如較難溶解,可60℃水浴加熱約30min促進溶解);用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

3、操作表:

試劑名稱

對照管

測定管

新鮮土樣(g

0.05

0.05

試劑一(μl

300

 

試劑二(μl

 

300

混勻, 37℃振蕩反應1h后,8000g 4℃離心10min,取200μl上清液于微量石英比色皿或96孔板中,405nm處測定吸光值A,計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管設一個對照管。

S-LAP活力單位的計算

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

單位的定義:每天每g土樣每天生成1 μmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

S-LAPμmol/d /g 土樣)=ΔA×V反總÷ε×d×106÷W÷T=14.8×ΔA

V反總:反應體系總體積,3×10-4 Lε:對硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;T:反應時間,1h=1/24d; W:樣本質量,0.05g。

b.96孔板測定的計算公式如下

單位的定義:每天每g土樣每天生成1 μmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

S-LAPμmol/d /g 土樣)=ΔA×V反總÷ε×d×106÷W÷T=29.6×ΔA

V反總:反應體系總體積,3×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,0.5cmT:反應時間,1h=1/24d; W:樣本質量,0.05g