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單寧含量檢測(cè)試劑盒(分光光度法 50T/48S)

貨號(hào) SH0037 售價(jià)(元) 768
規(guī)格 50T/48S CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱(chēng)

規(guī)格

SH0037

單寧含量檢測(cè)試劑盒(分光光度法 50T/48S)

50管/48樣

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義:

單寧是一類(lèi)廣泛存在于植物體內(nèi)的多元酚化合物,又稱(chēng)植物多酚。具有獨(dú)特的化學(xué)性質(zhì)和多種生理活性,如能與蛋白質(zhì)、生物堿、多糖結(jié)合;能與多種金屬離子發(fā)生絡(luò)合或靜電作用;具有止血、抑制微生物、抗過(guò)敏、抗突變、抗腫瘤、抗衰老等生理活性。

測(cè)定原理:

單寧在堿性環(huán)境下與磷鉬酸反應(yīng),生成藍(lán)色化合物,在760nm處有最大吸收峰。

試劑的組成和配制:

產(chǎn)品名稱(chēng)

SH0037-50T/48S

Storage

試劑一:液體

10ml

4℃

試劑二:液體

8ml

4℃

說(shuō)明書(shū)

一份

需自備儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽和蒸餾水。

單寧的提取:

按照組織質(zhì)量(g):蒸餾水體積(ml)15~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1ml蒸餾水),充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP管中,80℃水浴提取30min8000 g,25℃離心10 min,取上清液待測(cè)。

測(cè)定步驟:

1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至760nm,蒸餾水調(diào)零;試劑一和試劑二37℃預(yù)熱10min以上;

2、操作表:

試劑名稱(chēng)(μl

對(duì)照管

測(cè)定管

樣本

 

25

蒸餾水

675

650

試劑一

175

175

混勻,室溫靜置5min

試劑二

150

150

混勻,室溫靜置30min,760nm處讀取吸光值A,ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照,對(duì)照管只要做一管。

單寧含量計(jì)算

1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 1.6418x +0.0134;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml),yΔA(A測(cè)定-A對(duì)照)。

2、按樣本鮮重計(jì)算:

單寧含量(mg /g鮮重)= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷W×V1÷V2=0.609×(ΔA-0.0134) ÷W。

3、按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單寧含量(mg/mg prot)= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷(V1×Cpr)=0.609×(ΔA-0.0134) ÷Cpr。

V1:加入樣本體積,0.025mlV2:加入提取液體積,1ml; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本鮮重,g。

注意:

1、 ΔA控制在0.02-0.8范圍內(nèi),若ΔA大于0.8,將樣本提取上清液用蒸餾水稀釋10倍后檢測(cè),計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

2、標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為:0.025mg/ml-0.5mg/ml。